19 / 2023-04-16 21:33:03

孕哺期双酚AF暴露对成年雌性子鼠生殖发育的影响及机制探讨

生殖发育

摘要:目的：双酚类化合物是生产聚碳酸酯和环氧树脂等高分子材料的前体。其中以双酚A（BPA）的应用最广泛，但是近年来考虑其潜在内分泌干扰作用，BPA的使用受到限制。双酚AF（BPAF）作为BPA的新兴替代物，生产和使用量逐渐增加。已有体外研究提示BPAF可能比BPA更具有内分泌干扰作用，但是目前探讨BPAF的生殖发育毒性的哺乳动物研究匮乏。因此，本研究拟通过动物实验探讨其生殖发育毒性，并从类固醇激素的合成的角度初步探讨其机制。方法：选用雌性SD大鼠，将合笼后阴拴阳性的孕鼠随机分成四组，每组8只，对照组采用玉米油灌胃，剂量组经参阅文献确定，并设置为五倍的浓度梯度，将2、10和50 mg/kg的BPAF溶于玉米油进行灌胃染毒。从孕期第“0”天（Gestation Day 0，GD0）至断乳期（Postnatal Day 21，PND21）对母鼠进行BPAF灌胃染毒，断乳后每日检查其雌性子鼠阴道是否开口，并通过阴道涂片记录动情周期。待雌性子鼠成年期（PND70）麻醉取血后解剖，取出卵巢并称量湿重后，一侧卵巢保存于-80 ℃冰箱用于后续PCR检测，另一侧卵巢保存在多聚甲醛固定以便于观察卵巢病理形态；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清雌二醇（Estradiol，E2）和睾酮（Testosterone，T）水平。结果：孕哺期BPAF暴露导致成年雌性子鼠（PND70）动情周期有延长的趋势，卵巢组织囊状卵泡数量增加；并发现血清E2和T激素水平剂量依赖性下降、卵巢的类固醇激素合成相关mRNA表达水平下降（StAR、CYP11A1、17β3-HSD、CYP19A1）。结论：孕哺期BPAF暴露可能通过直接下调成年雌性子鼠的类固醇激素合成mRNA表达，导致血清E2和T水平紊乱，造成卵巢发育和功能障碍。