胞外电子转移（EET）过程是微生物燃料电池等生物电化学系统的关键过程，对EET活性位点的空间分布研究对于深入理解电活性微生物膜的EET机制具有重要意义。由于电活性微生物膜/电极界面上不可避免的空间不均匀性，组分的复杂性，需要建立一种能够原位分析界面电子转移行为的有效手段 。斜入射光反射差（Oblique-incidence  reflectivity  difference，OIRD）技术是近二十年来发展起来的一种非标记、无损伤、实时在线探测界面变化的新方法。本工作使用自主构建的OIRD技术，利用聚苯胺膜的氧化还原特性产生OIRD信号，对其上附着的腐败希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens）CN32电活性生物膜的EET位点空间分布进行了研究。在开路状态下，聚苯胺膜通过EET过程被细菌释放的电子还原，由此产生的PANI氧化还原状态变化通过OIRD以实时、无创的方式敏感成像。由于电活性生物膜内的EET和OIRD信号之间的强相关性，OIRD差分图像表示空间分辨的EET通量，而原位OIRD信号揭示了EET过程中的动态行为，从而提供了与大量电化学数据互补的重要时空信息。
 

电活性微生物，斜入射光反射差，胞外电子转移，原位分析