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马尾藻多糖抑制LPS诱导的巨噬细胞铁死亡

马尾藻多糖；巨噬细胞；细胞极化；铁死亡

目的：为研究马尾藻多糖对抗脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的巨噬细胞极化和铁死亡，以明确马尾藻多糖免疫功能。方法：分离、提纯和鉴定马尾藻多糖，建立LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型。采用CCK-8（Cell Counting Kit-8）法检测马尾藻多糖对巨噬细胞增殖的影响，以实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）法和蛋白免疫印迹法( Western blot)法分别检测巨噬细胞极化相关指标CD80、CD163、白细胞介素-6 ( interleukin-6，IL-6)、白细胞介素-10 ( interleukin-10，IL-10)、精氨酸-1( Arginine-1，Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶( inducible nitric oxide synthase，iNOS)、肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α，TNF-α)的含量。为了解巨噬细胞铁死亡情况，以活性氧(reactive oxygen species , ROS)检测试剂盒检测ROS含量，并以蛋白免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物4（Glutathione peroxidase 4，GPX4）的表达。结果：成功分离马尾藻多糖，并鉴定它属于呋喃糖。高浓度马尾藻多糖对巨噬细胞具有促增殖作用，并对LPS诱导的细胞增殖抑制具有显著的保护作用。马尾藻多糖能使RAW26.7细胞向M2极化，并且能拮抗LPS诱导的M1极化。LPS可诱导巨噬细胞内的ROS水平显著增加，马尾藻多糖则可使其ROS水平显著降低。LPS诱导巨噬细胞的GPX4蛋白表达水平显著降低，高浓度的马尾藻多糖能显著上调其表达（P值均小于0.05）。结论：马尾藻多糖诱导巨噬细胞向M2极化，抑制 LPS诱导巨噬细胞向M1极化和铁死亡。