227 / 2021-07-05 23:53:13

piRNA影响DEHP诱导的青春期雄性大鼠生殖毒性

DEHP；piRNA；雄性生殖毒性

目的  探讨piRNA在邻苯二甲酸(2-乙基己基酯)（DEHP）诱导青春期雄性大鼠生殖毒性中的作用及可能的机制。

方法  将6周龄的青春期雄性SD大鼠随机分为对照组和DEHP暴露组，对照组和DEHP暴露组分别给予玉米油和1000 mg/kg·day DEHP连续灌胃28天。染毒结束，收集大鼠血清和睾丸组织，采用ELISA法检测血清睾酮水平，HE染色法观察睾丸组织结构病理改变，piRNA芯片检测大鼠睾丸组织piRNA表达水平，用实时荧光定量PCR（qPCR）法验证10个明显下调的piRNA表达水平；生物信息学方法对经验证差异性表达的piRNA进行靶基因预测以及靶基因GO功能和KEGG pathway富集分析；Western blot法检测FoxO通路蛋白表达水平。

结果  1000 mg/kg·day DEHP暴露可导致大鼠睾丸组织结构损伤、血清睾酮水平下降以及附睾精子数量减少；与对照组相比，1000 mg/kg·day DEHP染毒组有1351个piRNA表达上调，944个piRNA表达下调；用生物信息学方法对10个表达水平明显下调的piRNA进行靶基因预测和KEGG pathway富集分析发现，大鼠睾丸组织中piRNA参与FoxO通路的调节，其中FoxO通路中的INSR、IRS1 和AMPKα1基因的mRNA可能分别是piR-rno-26751、piR-rno-37344和piR-rno-1013的靶mRNA。另外，暴露于1000 mg/kg·day DEHP导致FoxO通路中INSR、IRS1以及磷酸化Akt（p-Akt^Thr308）蛋白的表达水平显著下降，FoxO1和磷酸化AMPKα1（p-AMPKα1^ser485）的表达水平明显升高，PI3K蛋白表达水平下降但差异无显著统计学意义。

结论  暴露于1000 mg/kg·day DEHP可能通过下调睾丸组织piR-rno-26751、piR-rno-37344和piR-rno-1013表达水平，从而介导FoxO通路参与DEHP诱导大鼠睾丸毒性的调控。