3 / 2019-06-14 16:48:04

胆道闭锁特异性自身抗原的筛选及鉴定

胆道闭锁；自身抗原；自身抗体；蛋白质芯片技术

目的 采用人类全基因组编码蛋白质芯片技术筛选有诊断价值的胆道闭锁（BA）特异性自身靶抗原。方法 以2017年1月至2018年12月在本中心就诊的20例BA患儿、5例疾病对照组（DC）患儿和5例正常对照组（NC）血清为探针，利用全基因组蛋白质芯片技术和生物学聚类分析建立BA自身靶抗原差异谱，基于此制备抗原差异谱蛋白质小芯片，扩大临床样本量（BA患儿、其他淤胆性疾病患儿、正常对照组各80例血清），从中鉴定BA特异性自身靶抗原。结果 本研究共筛选出差异响应抗原281个，其中IgG响应79个，IgM响应150个，二者同时响应的26个，以差异倍数≥２、表达稳定的标准得到49个高响应抗原。GO功能分析发现差异抗原主要涉及调控细胞发育、增殖、凋亡及胆道形成。其中CENP6、UBQLN3、PDCD2、SPEG和RBPJ、CNPY4抗原在BA组中阳性率显著高于对照组（100% vs 0%,P<0.05）。进一步加大样本量鉴定发现，与正常对照组相比，BA组中CNPY4-IgM、RBPJ-IgG抗原表达显著上调，两者分别比较的差异均有统计学意义（CNPY4-IgM：t值=5.97，P<0.001；RBPJ-IgG（Q06330-2、4、6）t值分别为3.52、3.77、2.99，P值均<0.01），其对BA的诊断灵敏度可达52%、38%，特异度分别为92%、91%,两者作为区分BA患儿和健康对照的曲线下面积均可达77%（P均<0.05），GO功能分析提示这两个抗原参与Notch信号通路传导、TLR4受体表达等BA自身免疫致病机制过程。结论：本研究成功筛选出有可能作为BA无创性诊断标志物的特异性自身靶抗原，但仍需要更为深入的鉴定。